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服務(wù)支持

分光光度計(jì)對(duì)土壤速效磷的測(cè)定

摘要:磷存在與人體所有細(xì)胞中,是維持骨骼和牙齒的必要物質(zhì),幾乎參與所有生理上的化學(xué)反應(yīng)。磷還是使心臟有規(guī)律地跳動(dòng)、維持腎臟正常機(jī)能和傳達(dá)神經(jīng)刺激的重要物質(zhì)。

、前沿掌握比色法測(cè)定土壤速效磷的方法,了解土壤中磷素形態(tài)及其土壤供磷能力與土壤速效磷的關(guān)系。掌握土壤速效磷的浸提,浸提液的處理,標(biāo)準(zhǔn)曲線制作,顯色,比色,計(jì)算。

二、內(nèi)容與原理酸性土壤中的磷主要是以Fe—P,A1—P的形態(tài)存在,利用氟離子在酸性溶液中絡(luò)合Fe3 和Al3 的能力,可使這類土壤中比較活性的磷酸鐵鋁鹽被陸續(xù)活化釋放,同時(shí)由于H 的作用,也能溶解出部分活性較大的Ca—P,然后用鉬銻抗比色法進(jìn)行測(cè)定。

三、主要儀器及試劑配制儀器:塑料杯,往復(fù)式振蕩機(jī),可見(jiàn)分光光度計(jì)或光電比色計(jì)試劑: (1)0.03molL-1NH4F—0.025 molL-1HCl浸提劑稱取1.11克NH4F溶于800毫升水中,加1.0molL-1HCl25毫升,然后稀釋至1升,貯于塑料瓶中,其它試劑同前法。

(2)鉬銻抗試劑 稱取酒石酸銻鉀(KSbOC4H4O6)0.5克,溶于100毫升水中,制成5%的溶液。

另稱取鉬酸銨20克溶于450毫升水中徐徐加入208.3毫升濃硫酸,邊加邊攪動(dòng),再將0.5%的酒石酸銻鉀溶液100毫升加入到鉬酸銨液中,后加至1升,充分搖勻,貯于棕色瓶中,此為鉬銻混合液。

臨用前(當(dāng)天)稱取1.5克左旋抗壞血酸溶液于100毫升鉬銻混合液中,混勻。此即鉬銻抗試劑。(有效期24小時(shí),如貯于冰箱中,則有效期較長(zhǎng)。)

(3)磷標(biāo)準(zhǔn)溶液稱取0.439克KH2PO4(105℃烘2小時(shí))溶于200毫升水中,加入5毫升濃H2SO4,轉(zhuǎn)入1升量瓶中,用水定容,此為100 mgkg-1磷標(biāo)準(zhǔn)液,可較長(zhǎng)時(shí)間保存。取此溶液稀釋20倍即為5 mgkg-1磷標(biāo)準(zhǔn)液,此液不宜久存。

四、操作方法與實(shí)驗(yàn)步驟

1、稱取通過(guò)1毫米篩孔的風(fēng)干土樣品5克(精確到0.01克)于150毫升塑料杯中,加入0.03molL-1NH4F—— 0.025 molL-1HCl浸提劑50毫升,在20—30℃條件下振蕩30分鐘,取出后立即用干燥漏斗和無(wú)磷濾紙過(guò)濾于塑料杯中,同時(shí)作試劑空白試驗(yàn)。

2、吸取濾液10—20毫升于50毫升容量瓶中,加入10毫升0.8M H3BO3,再加入二硝基酚指示劑2滴,用稀HCl和Na0H液調(diào)節(jié)pH至待測(cè)液呈微黃,用鉬銻抗試劑5毫升顯色,并用蒸餾水定容,搖勻,在室溫高于15℃的條件下放置30分鐘,用紅色濾光片或660nm波長(zhǎng)的光進(jìn)行比色,以空白溶液的透光率為100(即光密度為0),讀出測(cè)定液的光密度,在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出顯色液的磷濃度(mgkg-1)。

3、標(biāo)準(zhǔn)曲線制備:吸取含磷(P)5mgkg-1的標(biāo)準(zhǔn)溶液0、1、2、3、4、5、6毫升,分別加入50毫升容量瓶中,加入10毫升0.8M H3BO3,再加入二硝基酚指示劑2滴,用稀HCl和Na0H液調(diào)節(jié)pH至待測(cè)液呈微黃,再加入鉬銻抗顯色劑5毫升,搖勻,定容即得0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6 mgkg-1磷標(biāo)準(zhǔn)系列溶液,與待測(cè)溶液同時(shí)比色,讀取吸收值,在方格座標(biāo)紙上以吸收值為縱座標(biāo),磷mgkg-1數(shù)為橫座標(biāo),繪制成標(biāo)準(zhǔn)曲線。

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